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2019年04月29日

(2019-04-29 07:33:18)
标签:

杂谈

2019年04月29日

构建基因文库

 

试题研究:2019年4月的选考试题中,选修部分还是相当有难度的,综合性强,应用性强,需要有选修部分知识的框架,特别是第(1)小题。

一、试题特点

试题的情境是生物技术应用于“培育抗病品种”,技术涉及到基因工程技术、单克隆抗体技术、探针技术、植物组织培养技术(花粉离体培养技术和胚的离体培养技术)等,这其实也是教材中提到的植物细胞工程技术(基因工程、细胞融合、显微注射、植物组织培养)有关,另外,还有必修教材中的杂交育种、基因的表达等知识。

二、备考策略

在教学中,不仅需要关注技术的介绍,更重要的是需要关注技术的应用,需要创设情境用所学的知识解决问题。

三、单克隆抗体探针从基因文库中准确获取目的基因方法

试题的难点是单克隆抗体(单抗)探针如何从基因文库中准确获取目的基因,下面就此方法作一简单介绍:

用单克隆抗体(单抗)探针筛选目的基因是重组DNA技术中的一项新方法,目前已在多个领域中得到应用。

1.为了获得某个特定基因,可以先提取mRNA,然后通过特定的单克隆抗体所识别的mRNA体外翻译系统的产物来确定特定的mRNA,然后反转录cDNA并克隆,得到单克隆抗体所识别蛋白的基因。

2.克隆的DNA与被单克隆抗体通过体外翻译系统确定了的mRNA杂交,目的基因的DNA由于与单克隆抗体所确定的mRNA互补,其转录mRNA的作用被抑制,因而被抑制转录功能的基因,即为所筛选的基因。

3.用单克隆抗体提纯抗原,以分析抗原的全部或部分氨基酸序列,再推导出相应的DNA碱基序列,根据DNA序列可以人工合成寡聚核苷酸探针,用此探针在基因组文库或cDNA文库中筛选单克隆抗体所识别抗原的基因。

附:2019年4月选考题:

回答与利用生物技术培育抗病品种有关的问题:

(1)通过抗病性强的植株获取抗病目的基因有多种方法。现已获得纯度高的抗病蛋白(可作为抗原),可通过                      技术获得特异性探针,并将                    中所有基因进行表达,然后利用该探针,找出能与探针特异性结合的表达产物,进而获得与之对应的目的基因。

(2)将上述抗病基因通过转基因的方法导入植物的分生组织可获得抗病性强的植株。若在试管苗期间用分子水平方法判断抗病基因是否表达,应检测               

                  (A.质粒载体     B.转录产物     C.抗性基因     D.病原微生物)

(3)植物细胞在培养过程中往往会发生           ,可利用这一特性筛选抗致病真菌能力强的细胞。筛选时在培养基中加入            ,并将存活的细胞进一步培养至再生植株。若利用            培养建立的细胞系用于筛选,则可快速获得稳定遗传的抗病植株。

(4)用抗病品种与高产品种进行杂交育种过程中,有时会遇到因胚发育中止而得不到可育种子的情况。若要使该胚继续发育获得植株,可采用的方法是                         

答案:(1)单克隆抗体    基因文库     (2)B     (3)变异     高浓度的真菌     (4)花粉离体    (5)胚的离体培养  

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