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lncrnafish探针锐博生物 |
分类: 优惠活动 |
lncRNA定位多样化,细胞核、核质、胞浆等;位置决定功能及机制,这个一定要看清楚。
(NATURE
REVIEWS | GENETICS,2016)
由锐博生物自主研发的lncRNA FISH检测试剂盒,创新性地改进了lncRNA分子的特
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sirna文库信号通路 |
分类: siRNA |
细胞因子TGF-β调控多个生物学过程,包括免疫抑制、血管生成、愈伤及上皮间质转化(EMT)等。TGF-β信号失调与自身免疫失调和感染性 疾病、纤维化、肿瘤发生和转移以及其他疾病有关。TGF-β会与其I型受体(TGFBRI)结合,并进一步再结合TGFBRII,导致转录因子 SMAD2/SMAD3被激活。
本项研究中,研究者希望找到这条通路中TGFBRI和TGFBRII这两个TGF-β的潜在调控因子。他们将一个蛋白激酶组siRNA文库转染 到A549和MDA-231-1833乳腺癌细胞中,同时转染TGFBRI激酶活性报告载体(BTR4),该载体在TGFBRI激酶活性缺失时会发出荧 光。在TGF-β刺激下,有多个促TGF-β信号反馈基因被筛选出来,作为二轮筛选的候选基因。
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红斑狼疮mirna |
在本项研究中,由锐博生物所提供siRNA、miRNA antagomir/agomir等多个产品效果非常优秀。其中最值得关注的是,研究者在不使用转染试剂的情况下,以200nM终浓度将 miRNA antagomir直接转入到了B细胞中,使得胞内miR-7的浓度明显降低,miR-7对于PTEN的调控作用也
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非编码rnamirnalncrna |
通常,人们按照RNA分子翻译蛋白的能力将其划分为信使RNA(message RNA, mRNA)及非编码RNA(non-coding RNA, ncRNA),mRNA作为模板,被核糖体直接翻译为对应的蛋白质,而ncRNA由于缺少翻译蛋白能力,最初并没有受到重视,直到近些年来,包括miRNA、piRNA及lncRNA等ncRNA被发现在很多生物过程及疾病发生中发挥了很大作用,但很多ncRNA都是通过直接靶向作用于一些蛋白编码基因而起到调控作用,例如miRNA在mRNA的3’UTR区域识别种子序列并结合、piRNA通过乒乓机制与Piwi蛋白形成复合体,影响转座子转录等。
看起来ncRNA不会通过编码蛋白来实现自我价值,但无数事实已经证明,科学是没有不可能的。随着技术的发展,近年来慢慢有学者发现了ncRNA表达蛋白质的潜力。2005年,数位日本学者在果蝇中鉴定出了多个与mRNA具有一定相似性的ncRNA,且有许多短肽序列可以与这些ncRNA序列相对应,但是用这类RNA分子所预测的蛋白质序列在其他相近物种中并不保守,所以当时研究者认为它们依然只是以非编码RNA分子的身份发挥功能;今年二月,美国哈佛大学研究者在Science发表论文,报道了他们对胚胎形成的最新研究结果,他们发现,在斑马鱼胚胎形成早期,一种由lncRNA生成的Todd
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mirnalet-7健康 |
分类: miRNA |
1.miRNA let-7 的生物学特征
let-7 最早是在秀丽隐杆线虫(
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sirna基因沉默锐博生物杂谈 |
分类: siRNA |
siRNA合成的方法主要包括:
1、化学合成
2、体外转录
3、长片断dsRNA经RNaseIII类降解(如Dicer、E.coli、RNaseIII)
4、siRNA表达载体或者病毒载体在细胞中表达siRNAs
5、PCR制备的siRNA表达框在细胞中表达
前三种方法主要都是体外制备siRNAs,并且需要专门的RNA转染试剂将siRNAs转到细胞内。后两种方法的优点在于不需要直接操作RNA,依赖能够表达siRNAs的DNA载体或者表达框转染到细胞中。每种方法都有有缺点,具体那种方法最好取决于试验目的。
一、化学合成siRNA分子:
尽管化学合成是最贵的方法,但是却是最方便的。研究人员几乎不需要做什么工作。生物公司可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格相对来说比其他方法高,定制周期长,特别
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edu细胞增殖检测锐博生物健康 |
分类: EdU |
EdU(5-Ethynyl-2’- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与Apollo?荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性。
分子量小 实验时间短
EdU的荧光染料是小分子物质,这种小分子化学反应检测方法反应快,效率高,反应时间仅需几分钟。相比BrdU检测需要抗原抗体过夜孵育,EdU检测只需要2.5个小时。
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edu细胞增殖锐博生物健康 |
分类: EdU |
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mirna健康 |
分类: miRNA |
起源阶段
siRNA:通常是外源的,如病毒感染和人工插入的dsRNA被剪切后产生外源基因进入细胞(注:病毒入侵,或者是自身合成RNA中出现错误,细胞内就会产生双链RNA,来阻止这些异常基因的表达)。
miRNA:是内源性的,是一种非编码的RNA;由miRNA基因表达出最初的pri-miRNA分子。
成熟过程
siRNA:直接来源是长链的dsRNA(通常为外源);经过Dicer酶切割形成双链siRNA,而且每个前体dsRNA能够被切割成不定数量的siRNA片段。
miRNA:在细胞核中转录的较大的pri-miRNA经由Drosha(一种RNAse
Ⅲ酶)和Pasha(含有双链RNA结合区域)加工成为单链pre-miRNA;接着,发夹状、部分互补的pre-miRNA在细胞质中被Dicer*(一种RNAse
Ⅲ酶)酶切割形成miRNA;在生物体中的表达具有时序性、保守性和组织特异性。
功能阶段
siRNA:它与RISC*(RNA诱导的沉默复合物,使用的AGO蛋白家族的成分为AGO2)结合,以RNAi途径行使功能,即通过与序列互补的靶标mRNA完全结合(与编码区结合),从而降解mRNA
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荧光显微镜检测方法孵育培养基edu标记brdu |
荧光显微镜检测方法(以96