RVDSD_新浪博客

(2019-03-13 15:14)

信号转导通路（Signaling pathway）本身就是一种机制，或者说是一种过程，在这个过程中，一个信号到达细胞后（细胞表面，或者是细胞内部），这个信号就会触发一系列有序的事件（信号转导通路），最终导致细胞内出现一些变化。这些变化通常伴随着基因的表达或者是某些物质浓度的变化，这些事件能够使细胞对某种信号作出反应，并根据当前环境调整细胞自身的代谢活动。

信号转导通路始于某个信号本身，这个信号分子与细胞表面的信号分子受体结合，受体通过大量的不同的蛋白来将信号传递到细胞内部。从本质上来说，衔接蛋白（adaptor protein）与脚手架蛋白（Scaffold protein）都位于前述的这些蛋白集合中，它们负责将信号从受体进一步传递到细胞内部。

衔接蛋白与脚手架蛋白的区别就在于它们的功能和结构上的不同。脚手架蛋白的作用是通过“吸引”大量的，信号转导通路所需的不同蛋白

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如何看限制性内切酶的酶切结果

(2019-03-03 12:19)

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质粒

限制性内切酶

图片中的这个质粒长度为7338bp，其中含有1200bp的插入片段，现在我们使用两个限制性内切酶来切这个质粒，这两个限制性内切酶分别为HindII与BamHI，酶切的结果如下所示：

第一条泳道是DNA marker，范围是500bp到10000bp；

第二条泳道是没有切的质粒，作为对照，在这一条泳道中的质粒可能含有三种构象。

第一种是超螺旋，它结构致密，在凝胶中运动最快，我们可以看到这个片段。

第二种是含有切口的质粒，在质粒DNA复制过程中,

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有关天然免疫识别病原体核酸的一篇综述

(2018-12-31 08:56)

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Tan, X., et al. （2018）. 'Detection of Microbial Infections Through Innate Immune Sensing of Nucleic Acids.' Annu Rev Microbiol 72: 447-478.

这篇综述是2018年发的，总结了天然免疫系统是如何识别病体核酸的，我觉得总结得比较好，就花了两天时间翻译了一下。

摘要：先天性免疫系统通过胚系编码的模式识别受体（PRR，Pattern recognition receptor）来识别微生物的入侵。由于大多数微生物病毒在其生命周期中都含有DNA和/或RNA，因此对于核酸的识别是宿主先天性免疫防御的一个重要策略。病原体来源的核酸可以被特定的宿主PRR识别，这些PRR位于内体溶酶体（endolysosome）和细胞质中。PRR的活化能触发信号级联反应，造成IFN-I和促炎症细胞因子的积累，导致宿主细胞处于抗菌状态，激活

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CoIP的结果解读

(2018-12-27 12:12)

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coip

免疫学

蛋白相互作用

最近读了一篇文献，里面使用了一些CoIP实验，搜索了相关资料，以及向实验室做蛋白相互作用的高手求教了之后，总结了CoIP的笔记。

文献信息如下：

Abe, T., et al. (2017). 'Germ-Cell-Specific Inflammasome Component NLRP14 Negatively Regulates Cytosolic Nucleic Acid Sensing to Promote Fertilization.' Immunity 46(4): 621-634.

CoIP的原理图，如下所示：

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HiPerFect转染试剂的使用

(2018-12-21 16:00)

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在做miRNA的相关实验中，在验证靶基因方面，通常是向靶细胞转染miRNA mimics，或者是构建稳定过表达的miRNA的细胞株，然后做WB即可。我的靶细胞是RAW264.7，但向这种细胞株转染miRNA mimics时，使用lipo2000或lipo3000的效率没那么高，不太容易做出结果（文献中有人使用的，效果很好，但我实验中总是做不出来）。后来在QIAGEN官网上搜到了一个转染试剂，HiPerFect，看介绍这个转染试剂是专门用于转染miRNA的。以下是实验流程，具体实验我还没做，只是翻译了说明书中的内容。